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詳細(xì)解說Agilent 1260液相色譜儀操作流程及注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):1711 更新時(shí)間:2018-01-04

  詳細(xì)解說Agilent 1260液相色譜儀操作流程及注意事項(xiàng)

  1、配制流動(dòng)相,水相置于棕色玻璃瓶中,有機(jī)相置于相應(yīng)無色玻璃瓶中。水相和有機(jī)相必須過濾,濾膜選用0.45有機(jī)系濾膜(尼龍)。注意:過夜的流動(dòng)相必須重新過濾。

  2、流動(dòng)相過濾后,置超聲儀中超聲20min。

  3、將已超聲的流動(dòng)相輕輕換上,動(dòng)作不要太劇烈,會(huì)產(chǎn)生氣泡,注意不要把有機(jī)相和水相換反了(A是有機(jī)相,B是水相)。

  4、將色譜柱接上,注意:流動(dòng)相的流動(dòng)方向必須和色譜柱上的箭頭方向一致。

  5、打開計(jì)算機(jī)電源、顯示器開關(guān),并輸入密碼。

  6、依次從上往下打開液相色譜儀上的所有開關(guān)。

  7、打開液相色譜在線工作站(online),輸入密碼。

  8、打開的液相工作站上分為四個(gè)小部分,依次為進(jìn)樣器、泵、柱溫箱及檢測器。在第二個(gè)部分設(shè)置流動(dòng)相的體積及溶劑瓶的總體積。

  9、脫氣:旋開purge閥開關(guān),右擊泵部分,選擇“method”,選擇B相100%,流速1ml/min,選擇確定;右擊泵部分,選擇“control”,選擇pump “on”,10秒后,調(diào)節(jié)流速為3ml/min,10秒后,調(diào)節(jié)流速5ml/min,開始水相脫氣3min,水相脫氣結(jié)束后,將流速按照5ml/min-3ml/min-1ml/min的流程往下調(diào)。然后開始有機(jī)相脫氣,步驟同上,注意流速不可一下子從1ml/min調(diào)到5ml/min,需慢慢調(diào)節(jié)。流動(dòng)相脫氣結(jié)束后,旋緊purge閥開關(guān)。

  10、建立樣品的色譜方法:設(shè)置進(jìn)樣體積,選擇洗針進(jìn)樣,注明洗針位置;設(shè)置流動(dòng)相比例、流速及梯度洗脫條件,序列進(jìn)樣時(shí)設(shè)置樣品運(yùn)行時(shí)間和后運(yùn)行時(shí)間;打開柱溫箱,設(shè)置柱溫;打開紫外檢測燈,設(shè)置檢測波長。全部設(shè)置好后,保存方法,不要覆蓋別人的方法。

  11、譜圖保存路徑的設(shè)置:View—preferences—data path(第二個(gè)選項(xiàng))—remove舊的文件夾,add自己的文件夾。再打開Sequence—Sequence parameter—選擇Data path為自己的文件夾即可。

  12、設(shè)置進(jìn)樣序列,注意序列表的填寫。序列進(jìn)樣后,如想關(guān)閉泵及檢測器,請(qǐng)點(diǎn)擊Sequence—Sequence parameter選擇shutdown—standby。

  13、將樣品按順序擺放在自動(dòng)進(jìn)樣器的托盤上。

  14、注意泵壓力是否正常,色譜柱是否漏液,如一切正常,關(guān)上柱溫箱的蓋子。待基線平穩(wěn)后,點(diǎn)擊Sequence進(jìn)樣。

  15、進(jìn)樣結(jié)束后,需沖洗色譜柱,色譜柱很脆弱,需用心保護(hù)。

  16、液相用完后,請(qǐng)關(guān)閉液相色譜在線工作站,依次關(guān)閉液相色譜儀上的開關(guān),zui后關(guān)閉計(jì)算機(jī)。

  17、將自己的色譜柱換下時(shí),需用連接管代替色譜柱連在液相上,不可以讓其暴露在空氣中。

  18、從計(jì)算機(jī)中拷取譜圖必須使用CD/DVD盤刻錄,不可直接使用U盤。

  19、請(qǐng)大家共同維護(hù)液相色譜儀,每次做完液相,請(qǐng)收拾液相臺(tái)面,注意臺(tái)面的整潔,并注意廢液瓶,及時(shí)倒出廢液。

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